Содержание цитокинов и лимфоцитарно - тромбоцитарная адгезия у больных с перитонитом на фоне артериальной гипертензии

Читинская государственная медицинская академия

Заболевания органов брюшной полости, сопровождающиеся перитонитом, индуцируют со стороны организма биологически целесообразную воспалительную реакцию, направленную на ограничение очага деструкции, его санацию, организацию и регуляцию репаративных процессов [2,3]. Течение перитонита состоит из типовых патофизиологических процессов, определяющих состояние в послеоперационном периоде и исход. Отклонения в системе иммунной защиты ведут к нарушению процесса саногенеза, развитию осложнений, неблагоприятному исходу [9]. Перитонит всегда протекает с нарушениями реологии крови и гемостаза [9,12].

Особый интерес представляет изучение перитонита при сопутствующей патологии, такой как артериальная гипертензия. Имеются основания считать, что перитонит и артериальная гипертензия взаимопотенцируют некоторые отклонения гемостаза, иммунитета и микроциркуляции. В последнее время активно изучаются механизмы взаимодействия звеньев единой клеточно – гуморальной защиты организма, объединяющей иммунитет и гемостаз. Одним из ключевых моментов такого взаимодействия является лимфоцитарно – тромбоцитарная адгезия (ЛТА). Однако в литературе нет сведений о роли феномена лимфоцитарно – тромбоцитарной адгезии при перитонитах на фоне артериальной гипертензии. Работа в этом направлении является весьма перспективной, поскольку тромбоциты содержат интерлейкины, способные изменять течение иммунного ответа. Нет сведений в литературе и о цитокиновом балансе при перитонитах на фоне сопутствующей артериальной гипертензии.

Цель работы – оценить особенности изменений цитокинового статуса и состояния сосудисто-тромбоцитарного гемостаза у больных с перитонитом на фоне артериальной гипертензии.

Материалы и методы. Обследовано 32 больных с разлитым гнойно–фибринозным перитонитом в раннем послеоперационном периоде (1 сутки после лапаротомии по поводу перфорации язвы желудка или двенадцатиперстной кишки) в условиях отделения реанимации на базе городской клинической больницы №1 г. Читы. В работе с людьми соблюдались этические принципы, предъявляемые статьей 24 Конституции РФ и Хельсинской Декларацией Всемирной медицинской ассоциации (World Medical Association Declaration of Helsinki) [5,11]. Исследования проводились с информированного согласия пациентов и после положительного решения локального этического комитета. 1-ая группа представлена 15 больными, не имеющими в анамнезе артериальной гипертензии, 2-ую группу составили пациенты с перитонитом, страдающие артериальной гипертензией (17 человек). Средний возраст больных составил 44±5 лет. Диагностическими критериями артериальной гипертензии являлись анамнестические данные, электрокардиографические признаки гипертрофии левого желудочка. Определение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии проводили по методу Ю.А. Витковского [3,13,14]. Подсчитывали число лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов на 100 клеток (так называемых лимфоцитарно-тромбоцитарных розеток, за которые принимали лимфоцит, присоединивший не менее 3 кровяных пластинок). Степень адгезии оценивали по количеству тромбоцитов, агрегированных с лимфоцитом [2,3].

Кроме того, выполнялся анализ уровня провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в крови больных с перитонитом в зависимости от наличия у пациентов сопутствующей патологии – артериальной гипертензии. Уровень фактора некроза опухолей – альфа (TNFa), интерлейкина – 1бета (IL-1β), интерлейкина – 10 (IL-10) в крови больных устанавливался методом твердофазного ИФА с использованием наборов реагентов фирмы «БиоХимМак» (г. Москва). Измерение их уровня осуществляли в соответствии с инструкцией фирмы производителя.

Группой клинического сравнения являлись 20 здоровых добровольцев. Статистическая обработка проводилась с помощью программы Biostat с использованием параметрических (критерий Стъюдента) и непараметрических (критерий Манна – Уитни и χ²) статистических методов. Критический уровень значимости при проверке гипотез р=0,05. Результаты представлены в виде M±m.

Результаты и обсуждение. Установлено, что у пациентов с перитонитом на фоне сопутствующей артериальной гипертензии способность лимфоцитов образовывать коагрегаты с кровяными пластинками резко повышалась. Так, показатель ЛТА у них увеличивался в 2,5 раза (p=0,02), при этом степень адгезии не изменялась (табл.1). У пациентов с перитонитом без наличия артериальной гипертензии в анамнезе показатель ЛТА также увеличивался в 1,7 раза (p=0,01), степень адгезии также не изменялась. При этом показатель ЛТА у пациентов с перитонитом на фоне артериальной гипертензии увеличивался в 1,4 раза по сравнению с больными без сопутствующей патологии в анамнезе.

Таблица 1. Лимфоцитарно - тромбоцитарная адгезия у больных с перитонитом (M±m)

Таблица 1. Лимфоцитарно - тромбоцитарная адгезия у больных с перитонитом (M±m)

Примечания: здесь и далее р – статистическая значимость различий показателей относительно группы контроля; р1 - статистическая значимость различий между показателями 1 и 2 групп.

Механизмы нарушения кровообращения и повреждения тканей в условиях перитонита изучены недостаточно. Воспалительный процесс может изменять структуру мембран клеток, активировать гемостаз, повреждать эндотелий либо нарушать его секреторную функцию [8,10]. Реализация механизмов защиты при повреждении стенки сосудов сопровождается повышением адгезивной активности кровяных пластинок к лимфоцитам (так называемый феномен лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА) [3,4,15], объясняющий взаимосвязь между системами иммунитета и гемостаза. Активация тромбоцитов способствует усилению феномена ЛТА [6]. При заболеваниях, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами и развитием диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС), показатель ЛТА значительно изменяется [4].

Полученные результаты позволяют утверждать, что у больных с перитонитом наличие артериальной гипертензии в анамнезе влияет на течение патологического процесса. Известно, что феномен лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии представляет собой одну из физиологических функций, присущую различным субпопуляциям лимфоцитов и реализуемую посредством адгезивных молекул. Повышение способности клеток к образованию коагрегатов свидетельствует об их высокой функциональной активности.

Как показали наши исследования, у больных с перитонитом на фоне сопутствующей артериальной гипертензии резко увеличивается концентрация цитокинов IL-1β в 10 раз, IL-10 в 73 раза по сравнению с группой контроля, в то время как у пациентов без наличия сопутствующей артериальной гипертензии возрастала в 3,2 и 34 раза соответственно (p<0,05). Одновременно выявлялось снижение уровня TNFa: у пациентов на фоне артериальной гипертензии в 56 раз против 1,9 у пациентов без артериальной гипертензии в анамнезе, по сравнению с группой клинического сравнения (p<0,05) (табл.2).

Таблица 2. Содержание цитокинов в крови у больных с перитонитом (М±m)

Таблица 2. Содержание цитокинов в крови у больных с перитонитом (М±m)

IL-1β при развитии воспалительных, инфекционных и онкологических заболеваниях в первый момент опосредованно угнетает агрегацию тромбоцитов, замедляет процесс свертывания крови и активирует фибринолиз. Однако в дальнейшем он стимулирует гемокоагуляцию и является одним из главных инициаторов развития ДВС [7]. Затухание воспалительных реакций связано с повышением в патологическом очаге и крови противовоспалительных цитокинов IL-10 и других. Повышение уровня IL-10 сопровождается уменьшением ЛТА и, следовательно, прекращением миграции иммуноцитов в очаг повреждения. Одновременно с этим IL-10, замедляя свертываемость крови и стимулируя фибринолиз, устраняет гиперкоагуляцию [6,7]. Повышение уровня IL-10 ведет к снижению противоинфекционной защиты и развитию хронических инфекций. TNFa играет важную роль в первые моменты возникновения воспалительной реакции, ибо активирует эндотелий и способствует экспрессии адгезивных молекул. TNFa индуцирует продукцию других провоспалительных цитокинов - IL-1β, IL-6 [6,7].

Изменения в цитокиновом балансе при перитонитах на фоне артериальной гипертензии может оказать существенное влияние на течение воспалительного процесса и привести к развитию таких осложнений в послеоперационном периоде, как, полиорганной недостаточности и хронизации заболевания.

Выводы

  1. Установлено, что у больных с перитонитом на фоне артериальной гипертензии резко повышается продукция цитокинов: IL-1β в 3,1 раза, IL-10 в 2,1 раза относительно группы больных с перитонитом без фоновой патологии и отмечалось снижение продукции TNF-альфа в 29 раз соответственно, что свидетельствует об активном воспалении и повреждении эндотелия.
  2. ЛТА у больных с перитонитом на фоне артериальной гипертензии увеличивалась в 1,4 раза по сравнению с больными перитонитом без фоновой патологии. При этом степень адгезии не изменялась. Это свидетельствует о нарушениях в системе иммунитета и гемостаза, а также об эндотелиальной дисфункции.

Список использованных источников:

  1. Баркаган З.С. Введение в клиническую гемостазиологию. – М.: Ньюдиамед-АО, 1998. – 45 с.
  2. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Модуляция лимфоцитарно-тромбоцитарного взаимодействия интерлейкином-2// Цитомедины, цитокины и антигены главного комплекса гистосовместимости (HLA). Сб. науч. тр. Вып. 2. – Чита, 1999 - С. 32 - 34.
  3. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розеткообразования// Иммунология. - 1999. - № 4. - С. 35 – 37.
  4. Витковский Ю.А, Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно-томбоцитарной адгезии// XVIII съезд Физиологического общества им.И.П. Павлова. – Тез. докл. – Казань. – 2001. – С. 319.
  5. Конституция Российской Федерации. Статья 24. Глава 2: Права и свободы человека и гражданина. 1993.
  6. Кузник Б.И. Физиология и патофизиология системы крови. – Чита: Степанов М.А., 2002. – 136 с.
  7. Кузник Б.И., Максимова О.Г. Общая гематология: гематология детского возраста. – Ростов-на-Дону: Феникс, 2007. – 573 с.
  8. Лычев В.Г., Усынин В.В., Андриенко А.В., Самойлова Т.М. Исследование ритмов микроциркуляции и реологии крови у больных гипертонической болезнью// Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И.Мечникова. – 2009. - №.2. – С. 12 – 15.
  9. Петрищев Н.Н., Власов Т.Д. Физиология и патофизиология эндотелия. Дисфункция эндотелия. – СПб.: СПбГМУ, 2003. – 380с.
  10. Сеидова Г.Б. Дисфункция эндотелия и развитие ИБС// Регионарное кровообращение и микроциркуляция. – 2005. - №4. – С. 13 – 19.
  11. Хельсинская декларация всемирной медицинской ассоциации. Глава 2: Клинические медицинские исследования. 1964.
  12. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. – СПб. 2000. – 208 с.
  13. Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. Interleukin 2 influence on platelet-lymphocyte adhesion// Thrombosis and Haemostasis. - Suppl. - Abstr. XVII Congr. of the ISTH. Washington D.C. August 14-21, 1999. - P. 141- 142.
  14. Vitkovsky Yu., Kuznik B., Solpov A. Role of interleukin-2 in lymphocytes rosette formation with platelet// Platelets 2000 Symp. 2000, Ma’ale Hachamisha, Israel. – P. 32.
  15. Vitkovsky Yu., Kuznik B., Solpov A. Cytokine influence on lymphocyte-platelet adhesion// Thrombosis and Haemostasis. – Suppl. – July, 2001. – P. 2711.