Актуальность проблемы. Стремительное развитие химической, фармацевтической, металлургической, машиностроительной промышленности, интенсивная химизация сельского хозяйства, использование большого ассортимента химических средств в быту создает угрозу глобального загрязнения внешней среды химическими веществами, среди которых встречаются соединения, представляющие как потенциальную, так и реальную опасность для здоровья населения.
В настоящее время окружающая среда загрязнена пестицидами, так как современное сельскохозяйственное производство невозможно представить без пестицидов [1,7]. Большую часть химических соединений, которые попадают во внешнюю среду и оказывают неблагоприятное воздействие на организм, составляют пестициды, широко используемые во всем мире для защиты растений от вредителей, болезней и сорняков. Только в 1994 г. в странах Центральной Европы и СНГ использовано 80000 пестицидов разных химических групп в пересчете на действующее вещество. Значительное количество от общего объема пестицидов составляют гербициды - производные феноксиуксусной кислоты (2,4Д), триазина (атразин), ацетанилида (алохлор, ацетохлор, метолахлор), и фунгициды - препараты меди и серы, производные триазола. Для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур используется также широкий ассортимент инсектоакарицидов - фосфорорганических, карбаматных, хлорорганических и синтетических пиретроидов. Доминирующими среди фосфорорганических пестицидов (ФОП) является диметоат, хлорорганических (ХОП) - байтан, карбаматных - карбофуран, синтетических пиретроидов - децис и циперметрин. Некоторые пестициды являются глобальными загрязнителями окружающей среды (ДДТ, ГХЦГ, 2,4Д, атразин и другие).
Которан, N-(3-трифторметилфенил)-N, N-диметилмочевина, почвенный гербицид, применяется для борьбы с сорняками в посевах хлопчатника. Механизм токсического действия многих химических групп пестицидов в большей или меньшей степени изучен, на основании чего базируется современная регламентация их в объектах окружающей среды, разрабатываются профилактические мероприятия по предупреждению негативного влияния на организм человека, проводится поиск антидотной терапии.
В связи с применением ядохимикатов в народном хозяйстве возрос интерес к исследованию воздействия пестицидов на иммунные структуры организма. В зонах развития сельского хозяйства увеличивается количество применяемых различных химикатов, которые попадая в организм человека приводит к нарушению функции кишечника и к различным заболеваниям [7,9].
Длительное воздействие на организм даже малых концентраций химических веществ способствует возникновению скрытых, малосимптомных форм хронических интоксикаций, что делает особенно необходимым поиск новых путей изучения их патогенеза, а также разработку новых методов диагностики и профилактики.
Тонкая кишка является важной частью пищеварительной системы и выполняет не только всасывательную, пищеварительную, но и эндокринную, защитную и иммунную функцию [2-5,8].
Лимфоидным образованиям тонкой кишки придается немаловажное значение в поддержание иммунного статуса организма [1,3,4,6].
В литературе недостаточно уделено внимание на инфильтрации лимфоцитов эпителиального покрова тонкой кишки, которые стоят на пути проникновения различных чужеродных веществ, в том числе и ядохимикатов в организм человека через пищу.
Целью нашего исследования явилось изучение количественного содержания лимфоцитов находящихся в эпителиальном покрове ворсинок тонкой кишки крысят до 3 месячного возраста в норме и при отравлении котораном.
Материал и методы исследования. Эксперименты были проведены на 70 крысах, которые были разделены на 2 группы: первая группа -контрольная и вторая группа - экспериментальная. Экспериментальные животные содержались в обычных условиях. Сразу же после рождения крысят, матерям в течение 21 дня (подсосный период крысят) ежедневно вводилось которан в дозе 1/100 LD 50 внутрижелудочно.
Самкам контрольной группы вводилась внутрижелудочно через зонд 1 мл дистиллированной воды. Забой крыс производилось в возрасте 1,30,60 и 90 дней постнатального развития под эфирным наркозом. Были взяты куски из проксимального, среднего и дистального отдела тонкой кишки и фиксировали 12% растворе формалина, затем проводили по спиртным батареям и заливали в парафин.
Из блоков на микротоме производили срезы толщиной 5-10 мкм. Окрашивали срезы гематоксилин-эозином.
На микропрепаратах с помощью окулярной линейки производилось морфометрические измерения. Подсчет лимфоцитов проведен с гематологическим счетчиком из расчета на 100 эпителиальных клеток ворсинки.
Результаты исследования и их обсуждение. У новорожденных крысят количество лимфоцитов на 100 эпителиальных клеток ворсинок начальной части брыжеечного отдела тонкой кишки колеблется от 5 до11, в среднем - 7,6±0,5, где процентное содержание малых лимфоцитов составляет 50,0% (3,8±0,4), средних лимфоцитов - 29% (2,2±0,2) и больших - 21% (1,6±0,2).
В среднем отделе тонкой кишки количество лимфоцитов варьирует от 4 до 11, в среднем 8,1±0,6, где малые лимфоциты составляют 55,6% (4,5±0,3), средне лимфоциты 24,7% (2,0±0,2) и большие - 20,7% (1,7±0,1) от общего количества лимфоцитов.
В конечном отделе тонкой кишки количества лимфоцитов незначительно возрастает, где общее количество лимфоцитов колеблется от 9 да 13, в среднем - 11,8±0,4, отсюда малые лимфоциты составляют 53% (6,25±0,64), средние лимфоциты - 30% (3,5±0,6) и большие 17% (2±0,2).
У 30 дневных крыс количество лимфоцитов на 100 эпителиальных клеток в начальном и в среднем отделах брыжеечной части тонкой кишки почти одинаково и варьировалась от 5 до 12, в среднем - 9,1±0,6. Процентное содержание малых лимфоцитов равно 61,6% (5,6±0,5), средних лимфоцитов - 21,9% (2,0±0,2) и больших - 16,5% (1,5±0,1). В конечном отделе брыжеечной части тонкой кишки количество лимфоцитов колеблется от 9 да 14, в среднем - 11,9±0,4, отсюда малые лимфоциты составляют 53% (6,3±0,43), средние лимфоциты - 31% (3,7±0,6) и большие 16% (1,9±0,2).
На 60 сутки развития крыс общее количество лимфоцитов на 100 эпителиальных клеток ворсинок в начальной части брыжеечного отдела тонкой кишки колеблется от 7 до 11 в среднем - 9,2±0,3, где малые лимфоциты составляют - 63,0% (5,8±0,2), средние лимфоциты - 23,9% (2,2±0,2) и большие - 13,1 % (1,2±0,1). В средней части брыжеечного отдела тонкой кишки количество лимфоцитов варьирует от 7 до 13, в среднем 9,5±0,4, где малые лимфоциты составляют 64,2% (6,1±0,3), средние лимфоциты 23,2% (2,2±0,2) и большие-12,6% (1,2±0,1) от общего количества лимфоцитов.
В конечном отделе тонкой кишки количества лимфоцитов незначительно возрастает, где общее количество лимфоцитов колеблется от 9 да 13, в среднем - 10,8±0,4, отсюда малые лимфоциты составляют 63% (6,8±0,64), средние лимфоциты - 23,2% (2,5±0,6) и большие 13,8% (1,5±0,2).
На 90 сутки развития крыс общее количество интраэпителиальных лимфоцитов ворсинок в начальной и средней части брыжеечного отдела тонкой кишки почти одинаково и колеблется от 7 до 11 на 100 эпителиоцитов, в среднем 9,5±0,3, где малые лимфоциты составляют 63,2% (6,0±0,3), средние лимфоциты 23,2% (2,2±0,1) и большие - 13,7% (1,3±0,1) от общего количества лимфоцитов. В дистальной части брыжеечного отдела тонкой кишки количество лимфоцитов варьирует от 7 до 15, в среднем 11,0±0,4, где малые лимфоциты составляют 59,1% (6,5±0,3), средние лимфоциты 28,2% (3,1±0,2) и большие - 12,7% (1,4±0,1) от общего количества лимфоцитов.
На 30 сутки развития крыс экспериментальной группы количество лимфоцитов на 100 эпителиальных клеток в начальном и в среднем отделах брыжеечной части тонкой кишки почти не изменяется и варьирует от 8 до 15, в среднем - 12,6±0,5. Процентное содержание малых лимфоцитов равно 59,5% (7,5±0,4), средних лимфоцитов - 22,9% (2,88±0,2) и больших - 17,6% (2,2±0,1). В конечном отделе брыжеечной части тонкой кишки количество лимфоцитов колеблется от 9 да 16, в среднем - 12,9±0,5, отсюда малые лимфоциты составляют 57,5% (7,42±0,35), средние лимфоциты - 28,5% (3,67±0,34) и большие 14,0% (1,8±0,1).
На 60 сутки развития крыс экспериментальной группы количество лимфоцитов на 100 эпителиоцитов ворсинок начальной части брыжеечного отдела тонкой кишки находится в пределах от 7 до 14 в среднем - 11,2±0,3, где малые лимфоциты составляют - 60,7% (6,8±0,2), средние лимфоциты - 25,0% (2,8±0,2) и большие - 14,3 % (1,6±0,1). В средней и конечной части брыжеечного отдела тонкой кишки количество лимфоцитов варьирует от 8 до 16, в среднем -12,1±0,4, от которого малые лимфоциты составляют 58,7% (7,1±0,3), средние лимфоциты 26,5% (3,2±0,2) и большие - 14,9% (1,8±0,1) от общего количества лимфоцитов.
На 90 сутки развития постнатального онтогенеза у экспериментальных крыс количество лимфоцитов на 100 эпителиоцитов ворсинок начальной части брыжеечного отдела тонкой кишки находится в пределах от 9 да 13, в среднем - 10,8±0,4, отсюда малые лимфоциты составляют 63% (6,8±0,64), средние лимфоциты - 23,2% (2,5±0,6) и большие 13,8% (1,5±0,2). В средней и конечной части брыжеечного отдела тонкой кишки количество лимфоцитов варьирует от 8 до 16, в среднем 11,1±0,4, от которого малые лимфоциты составляют 59,5% (6,6±0,2), средние лимфоциты 27% (3,0±0,2) и большие - 15,3% (1,7±0,1) от общего количества лимфоцитов.
Выводы. Таким образом, результаты исследования показали, что при воздействии которана в ранние сроки эксперимента усиливается инфильтрация лимфоцитами эпителиального покрова ворсинок тонкой кишки, а в поздние сроки постепенно приближается к контрольной группе.
С возрастом в обеих группах наблюдается тенденция к увеличению в процентном соотношении малых лимфоцитов на фоне снижения средних и больших, это свидетельствует об увеличении доли зрелых лимфоцитов в эпителиальном покрове.