Введение. Шизофрения с манифестацией в раннем возрасте является достаточно редким расстройством. Раннее начало шизофрении, как правило, свидетельствует в пользу неблагоприятного прогноза течения эндогенного психического расстройства.
Исследования генетических аспектов шизофрении с ранним началом немногочисленны в связи с трудностями формирования выборки больных. При этом зачастую научные работы, соответствующие данной тематике, имеют ограничения в виду небольшого размера исследуемой группы, что, возможно, не позволяет выявить статистически достоверную взаимосвязь между шизофренией с ранним началом и изучаемыми генетическими маркерами. Тем не менее, на данный момент в литературе имеются сведения об ассоциации между шизофренией с ранним началом и полиморфизмом генов-кандидатов эндогенных психозов, в частности дофаминового рецептора D3 [9], активатора оксидазы D-аминокислот (DAOA) [5], триптофангидроксилазы [11], серотонинового рецептора типа 2А (5-HTR2A) [2], мозгового нейротрофического фактора (BDNF) [3].
Дальнейшее изучение шизофрении с ранним началом в контексте молекулярно-генетических механизмов остаётся перспективным и малоизученным направлением современной психиатрии, что определяет актуальность данного исследования в теоретическом и практическом плане.
Целью настоящей работы явилось определение частоты встречаемости аллелей и генотипов нескольких генов, имеющих отношение к функционированию нейрохимических систем мозга, у больных шизофренией с ранним началом.
Материалы и методы. В соответствии с поставленной целью обследовано 140 больных шизофренией (68 женщин, 72 мужчин; возрастной диапазон – от 18 до 52 лет включительно) с различной продолжительностью заболевания, поступивших для лечения в психиатрические стационары г. Саратова и Саратовской области по поводу обострения шизофренического процесса. Основными критериями отбора являлись: верифицированный стационарным обследованием диагноз шизофрении «F20» в соответствии с диагностическими критериями Международной классификации болезней десятого пересмотра (МКБ-10), соматическое благополучие, манифестация эндогенного психоза в возрасте до 17 лет включительно.
Группу контроля составили 96 соматически и психически здоровых лиц, не состоявших в родстве с обследованными, не имеющих семейной отягощенности по шизофрении (53 женщины и 43 мужчины; возрастной диапазон – от 21 до 63 лет включительно) из числа жителей Саратова и Саратовской области.
Все больные и лица контрольной группы дали информированное согласие на участие в исследовании.
Материалом исследования являлась периферическая венозная кровь пациентов, взятая из кубитальной вены. Материалы для генотипирования отправлялись в лабораторию клинической генетики Научного центра психического здоровья Российской академии медицинских наук (НЦПЗ РАМН) (зав. лабораторией – доктор биологических наук В.Е. Голимбет), где из образцов крови выделяли дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) с помощью фенол-хлороформного метода.
Для анализа ассоциации между шизофренией и геном использовали следующие маркеры: полиморфизм Val66Met (полиморфный сайт в гене BDNF, обусловленный заменой гуанина на аденин, что вызывает замещение аминокислот: валин (Val) замещается метионином (Met) в кодоне 66) – аллели Val и Met – для гена BDNF; полиморфизм Т102С (полиморфизм, обусловленный нуклеотидной заменой тимина (Т) на цитозин (С)) – аллели T и C – для гена 5-HTR2A; полиморфизм С939T (полиморфизм, обусловленный нуклеотидной заменой цитозина на тимин) – аллели С и T – для гена дофаминового рецептора второго типа D2 (DRD2). Генотипирование проводили путем амплификации ДНК в полимеразной цепной реакции с использованием термоциклера Терцик (ДНК технологии).
Для сопоставления двух выборок по частоте встречаемости интересующего исследователя признака использовали статистический критерий углового преобразования Фишера (φ*эмп ) с подсчетом достоверности (p).
Результаты и их обсуждение. На первом этапе исследования был проведён анализ аллельных частот в изученных полиморфизмах. Как видно из табл. 1, существенных различий встречаемости аллелей у страдающих шизофренией с ранним началом и в группе здоровых лиц обнаружено не было.
Таблица 1. Частота аллелей в изученных полиморфных участках больных шизофренией с ранним началом (n=140) и в контрольной группе здоровых лиц (n=96)
При исследовании распределения генотипов изучаемых генетических полиморфизмов значимых различий между группой пациентов, страдающих шизофренией с ранним началом, и контрольной группой здоровых лиц также не было обнаружено (табл. 2). Отсутствие связи не всегда указывает на то, что ген не ассоциирован с психическим заболеванием. Ранее проведённые молекулярно-генетические исследования шизофрении показывают, что каждый из генов в целом оказывает небольшое влияние на её развитие. Это влияние трудно выявить, учитывая клиническую гетерогенность шизофрении, которая может в значительной степени зависеть от отдельных клинических особенностей исследуемой группы больных.
Таблица 2. Частота генотипов в изученных полиморфных участках больных шизофренией с ранним началом (n=140) и в контрольной группе здоровых лиц (n=96)
Примечание: приведена частота генотипа; в скобках – число носителей.
Некоторые исследователи указывают на то, что связь соответствующих генов с шизофренией и с некоторыми ее патогенетическими параметрами (нейрофизиологическими, нейропсихологическими или морфометрическими) обнаруживается только в мужских выборках [6, 7, 10]. Поэтому на следующем этапе нашего исследования была предпринята попытка выявить связь генетических вариантов, предрасполагающих к развитию шизофрении с ранним началом, в однородных по полу выборках больных и здоровых лиц.
В табл. 3 представлены результаты анализа аллельных частот в изученных полиморфных участках у страдающих шизофренией с ранним началом женщин по сравнению с психически здоровыми женщинами. Каких-либо значимых различий встречаемости аллелей не отмечалось.
Таблица 3. Частота аллелей в изученных полиморфных участках страдающих шизофренией с ранним началом женщин (n=68) и в контрольной группе здоровых женщин (n=53)
При исследовании распределения генотипов изучаемых генетических полиморфизмов между группой женщин, страдающих шизофренией с ранним началом, и контрольной группой здоровых женщин для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A была обнаружена слабая ассоциация (φ*эмп=2.1; p<0,05) с наличием ранней шизофрении, обусловленная более высокой частотой встречаемости гомозигот TТ у больных женщин по сравнению со здоровыми женщинами (табл. 4). Ранее связь генотипа ТТ для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A с риском развития шизофрении была выявлена у женщин, страдающих шизофренией, без учёта возраста начала психического расстройства [1].
Таблица 4. Частота генотипов в изученных полиморфных участках страдающих шизофренией с ранним началом женщин (n=68) и в контрольной группе здоровых женщин (n=53)
Примечания: приведена частота генотипа; в скобках – число носителей; * - различия по частоте генотипа TT по сравнению с объединенными генотипами TC и CC значимы между больными и здоровыми (φ*эмп=2.1; p<0,05).
Анализ аллельных частот в изученных полиморфных участках у страдающих ранней шизофренией мужчин по сравнению с психически здоровыми мужчинами каких-либо значимых различий встречаемости аллелей не выявил (табл.5).
Таблица 5. Частота аллелей в изученных полиморфных участках страдающих ранней шизофренией мужчин (n=72) и в контрольной группе здоровых мужчин (n=43)
При сравнении мужских выборок больных шизофренией с ранними манифестами и здоровых лиц ассоциаций между изученными генетическими вариантами и ранней шизофренией найдено не было (табл. 6).
По данным R. Joober с соавторами [8], генотип СС для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A является прогностически неблагоприятным, частота генотипа СС 5-HTR2A выше в группе страдающих шизофренией мужчин, но не у женщин.
По результатам нашего исследования среди мужчин с ранней шизофренией наблюдалась тенденция к более частой встречаемости генотипа СС для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A в сравнении с выборкой страдающих ранней шизофренией женщин и контрольной группой здоровых мужчин, но различия в частоте не достигали статистической значимости.
Таблица 6. Частота генотипов в изученных полиморфных участках страдающих ранней шизофренией мужчин (n=72) и в контрольной группе здоровых мужчин (n=43)
Примечание: приведена частота генотипа; в скобках – число носителей.
Полученные результаты подтверждают мнения о том, что связь генов-кандидатов с характеристиками психоза обнаруживается только в однородных по полу выборках.
В ходе проведенного исследования в женской выборке больных шизофренией с ранним началом была обнаружена более частая встречаемость генотипа ТТ для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A в сравнении со здоровыми женщинами. Частота генотипа СС для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A у мужчин с ранней шизофренией была выше, чем у здоровых мужчин, на уровне статистически незначимой тенденции.
По данным литературы, генотип ТТ для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A рассматривается как протективный, тогда как генотип СС считают предрасполагающим к шизофрении с неблагоприятным течением заболевания [2]. В то же время многие авторы указывают, что половой диморфизм оказывает влияние на течение шизофренического процесса. Относительно менее прогредиентные периодические формы встречаются преимущественно у женщин, а наиболее прогредиентные, непрерывнотекущие, особенно злокачественные, — у мужчин [4].
По-видимому, клиническая неоднородность шизофрении обусловлена генетической гетерогенностью, обнаружить которую возможно только учитывая возраст начала болезни, половые различия и отдельные клинические проявления.
Заключение. Таким образом, на основании проведённого исследования можно предположить вовлечённость полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A в этиопатогенез шизофрении с ранним началом у женщин.