Актуальность. Актуальность проблемы псориаза у детей обусловлена ростом заболеваемости, недостаточным изучением разнообразных патогенетических механизмов и отсутствием эффективных методов лечения. В последние годы отмечена тенденция к росту заболеваемости псориазом у детей, особенно в дошкольном и младшем школьном возрасте, учащение тяжело протекающих форм [9, 14, 15]. Удельный вес псориаза в структуре детских дерматозов колеблется от 1 до 8%, при этом данный показатель среди госпитализированных детей составляет 8 - 22% [2, 3].
Для выявления причинных механизмов формирования псориаза в детском возрасте и разработки рациональной терапии, необходим комплексный подход к изучению данного дерматоза среди детского контингента больных [1, 4, 12]. Несмотря на многочисленные исследования, посвященные выявлению причин возникновения и патогенетических механизмов псориаза, многие вопросы остаются нерешенными [5, 6, 11, 14].
В настоящее время иммунной системе отводится одна из ведущих ролей в патогенезе псориаза. При этом основными положениями иммуннопатогенеза псориаза как аутоиммунного заболевания является формирование ложной сети взаимодействий цитокинов совместно с воспалительными клетками и кератоцитами после соответствующего сигнала [8]. Все больше значение в патогенезе псориаза придается провоспалительному цитокину фактору некроза опухоли-α (ФНО- α), который является в основном эндогенным медиатром воспалительной реакции организма. Многие авторы считают ФНО- α основным цитокином иммунных механизмов, лежащих в основе псориатического повреждения, который усиливает продукцию провоспалительных молекул, в частности ИЛ-1β [7, 10].
Целью данного исследования явилось изучение клеточного иммунитета и цитокинов ИЛ-1β и ФНО- α у детей с псориазом в разных возрастных группах.
Материалы и методы исследования. Исследование проводились на базе отделения детской дерматологии клиники ТашПМИ в период с 2009-2011 г., обследовано 68 детей больных псориазом в возрасте от 1 года до 14 лет включительно, которым было проведено иммунологическое исследование клеточного иммунитета (68 детей) и цитокинов ИЛ-1β и ФНО-α (20 детей). Для сравнительного анализа состояния иммунитета у детей, больных псориазом, были взяты аналогичные показатели у 37 практически здоровых детей соответствующего возраста.
Исследование иммунного статуса проводилось моноклональным тестированием субпопуляции лимфоцитов периферической крови CD3, CD4, CD8, CD22 по мембранным маркерам с использованием антилимфоцитарных антител производства НИИ иммунологии МЗ РФ (Москва, фирма «Сорбент»). Определение продукции интерлейкинов и интерферонов (ИЛ-1β и ФНО-α) в 20 исследуемых образцах (сыворотка крови) проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа с применением тест-систем «Вектор-Бест», Новосибирск (2010). Показатели циркулирующего иммуно-комплекса (ЦИК) изучали у 20 детей до и после лечения. ЦИК мелких и крупных величин определяли в сыворотке крови при помощи ПЭГ 3% и 4% методом приципитации.
Результаты исследования. При анализе иммунологических исследований у детей с псориазом было установлен дисбаланс клеточного иммунитета, характеризующийся достоверным повышением иммунорегуляторного индекса (ИРИ; Р<0,001) в 1,5-2 раза за счет снижения CD8+ - цитотоксических Т-лимфоцитов (Р<0,001), содержащих иммунный ответ, на фоне достоверного снижения CD3+ - Т-лимфоцитов (Р<0,05) во всех возрастных группах. У всех обследованных детей с псориазом в разных возрастных группах наблюдалось достоверное снижение CD16+ (Р<0,01). Анализ числа CD22+ позволил выявить наличие достоверного повышения числа В-лимфоцитов во всех возрастных группах (Р<0,01). Данный показатель имел зависимость от возраста, так чем старше были дети с псориазом, тем выше показатель CD22+. Подобное увеличение количество В-лимфоцитов можно объяснить как ответную реакцию организма на поступление различных бактериальных антигенов.
При этом у детей в возрасте 3-7 лет отмечается достоверное снижение CD3+ (50,2±0,8 против 62,9±1,01; Р<0,01) и, особенно, уровня CD8+ клеток (16,4±1,0 против 30,6±1,48; Р<0,001). Дисбаланс иммунорегуляции в этой возрастной группе определяется нормативными показателями CD3+ - Т-хелперов, так и иммуносупрессией за счет снижения CD8+клеток (Р<0,001). Показатели CD16+ были достоверно снижены по сравнению с контролем (18,6±0,8 против 21,86±1,21; Р<0,05). Содержание количества CD22+ было достоверно повышено (14,0±0,6 против 11,8±0,51; Р<0,01).
В возрасте 7-11 лет дисбаланс иммунорегуляции так же обусловлен достоверным снижением CD3+ (50,4±0,7 против 56,5±1,32; Р<0,001) и CD8+ клеток (16,0±1,0 против 28,0±1,07; Р<0,01) на фоне недостоверного снижения значений CD4+ (36,6±1,8 против 38,5±1,2) и достоверного повышения ИРИ (2,5±0,2 против 1,5±0,13; Р<0,001). Содержание CD16+ были достоверно снижены по сравнению с контролем (19,8±1,0 против 28,8±1,46; Р<0,01). Количество CD22+ у детей с псориазом данной возрастной группы было незначительно повышен (15,1±0,7 против 14,18±0,51; Р<0,01).
У детей в возрасте 11-14 лет наблюдалась такая же картина нарушения клеточного иммунитета. Показатели CD3+ в данной группе детей был достоверно снижен (49,9±1,0 против 53,5±1,0; Р<0,001). Наблюдалось достоверное повышение ИРИ (2,6±0,3 против 1,5±0,13; Р<0,001) за счет достоверного снижения CD8+ (16,4±1,2 против 25,0±2,07; Р<0,001) в 1,5 раза. Воспалительный процесс у детей данной группы сопровождался сниженной экспрессией CD16+ на лимфоцитах (19,4±0,9 против 26,8±1,46; Р<0,01), что указывало на функциональную неполноценность противоинфекционного иммунного ответа у детей с псориазов в возрасте 11-14 лет. Так же как у в других возрастных группа у данной категории детей наблюдалось достоверное повышение CD22+ (16,8±0,9 против 14,18±0,86; Р<0,05).
Таким образом, нами выявлен клеточный иммунодефицит, который проявился подавлением основных клеточных субпопуляций иммунной системы на фоне снижения CD8+ - Т-цитотоксических лимфоцитов. Учитывая, что супрессорные клетки регулируют гиперчувствительность замедленного типа, пролиферацию цитотоксических и антигенспецифических лимфоцитов, в сущности призванные эффективно нейтрализовать чужеродный антиген, снижение их количества свидетельствует о неэффективности функциональной активности у детей с псориазом во всех возрастных группах. Выявленный дисбаланс основных субпопуляций Т-лимфоцитов представляет собой определенное звено патогенеза при псориазе, отражая иммунологические сдвиги предшествующие или развивающиеся параллельно с углублением основного процесса и развитием осложнений.
Следующим этапом нашей работы было изучение ЦИК у детей с псориазом. Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) в крови - показатель развития различных воспалительных процессов в организме и показатель активности течения аутоиммунных заболеваний, с учетом этого нас заинтересовало изучение данного показателя в возрастном аспекте (рис. 1).
Рис. 1. Показатели ЦИК у обследованных детей в сравнительном аспекте.
Как видно из рисунка у детей с псориазом ЦИК 3% и ЦИК4% были повышены в отличие от контрольных цифр, это свидетельствует об аутоиммунном процессе.
Из полученных данных заметна возрастная динамика этих показателей, так в возрасте 3-7 лет содержание ЦИК 3% у детей с псориазом составило 10,2±0,3, что было достоверно повышено по отношению к контролю (Р<0,01) и снижено по сравнению с показателями детей старших возрастных группы (16,9±3,0 и 11,0±2,7 соответственно; Р<0,05). Содержание ЦИК 4% в данной возрастной группе достоверно повышалось в отношении контроля (15,2±5,2 против 12,6±0,51; Р<0,05) и так же снижалась в зависимости от возраста детей с псориазом (15,2±5,2 против 24,0±4,9 и 16,2±3,0 соответственно; Р<0,05).
При изучении показателей цитокинового статуса у обследованных детей в сравнительном аспекты мы выявили, что у детей с псориазом во всех возрастных группах наблюдается дисбаланс в цитокиновом статусе за счет повышения ИЛ-1 и ФНО-α, это свидетельствует о наличии иммунодефицитных состояний (табл. 1).
При изучении этих показателей в зависимости от возраста было выявлено их более выраженное снижение в отличие от показателей контрольной группы.
Таблица 1. Показатели цитокинового статуса у детей с псориазом (n=40)
Примечание: ОИИ↑ или ОИС↓ - общий индекс индукции или супрессии относительно показателей здоровых лиц.
Так, если в возрасте 3-7 лет ИЛ-1β снижался и его ОИС↓ составил 1,4, то в возрасте 7-11 и 11-14 этот показатель составил ОИС↓ 1,2 и ОИС↓ 1,3 соответственно.
У детей в возрасте 3-7 лет ФНО-α повышалось в отличие от группы практически здоровых детей и составило ОИИ↑ - 2,7, такая же тенденция наблюдалась с возрастом (ОИС↓ 1,4 и ↓1,9 соответственно 7-11 лет и 11-14 лет).
Таким образом, у детей с псориазом во всех возрастных группах выявлен клеточный иммунодефицит, который проявился подавлением основных клеточных субпопуляций иммунной системы на фоне снижения CD8+ - Т-цитотоксических лимфоцитов. Изучение циркулирующих иммунных комплексов в крови как мелких, так и крупных показало неадекватный иммунный ответ на антигенное воздействие иммунной системы, что было связано с критическими периодами процесса развития ребенка и свидетельствовало об аутоиммунном процессе.
У детей с псориазом во всех возрастных группах наблюдается дисбаланс в цитокиновом статусе за счет повышения ИЛ-1 и ФНО-α, это свидетельствует о наличии иммунодефицитных состояний и ослаблению защитных реакций организма.
Выводы
- Выявлен клеточный иммунодефицит, который проявился подавлением основных клеточных субпопуляций иммунной системы на фоне снижения CD8+ - Т-цитотоксических лимфоцитов.
- Изучение циркулирующих иммунных комплексов в крови как мелких, так и крупных показало неадекватный иммунный ответ на антигенное воздействие иммунной системы и свидетельствовало об аутоиммунном процессе, усиливающегося с возрастом, но особенно выраженного в возрасте 7-11 лет.
- У детей с псориазом во всех возрастных группах наблюдается дисбаланс в цитокиновом статусе за счет повышения ИЛ-1 и ФНО-α, это свидетельствует о наличии иммунодефицитных состояний и ослаблению защитных реакций организма.