В настоящее время указывается на повсеместное доминирующее увеличение аллергических заболеваний, среди взрослого и детского населения. Число больных с аллергическими заболеваниями в западных странах достигает в среднем до 20% от всего населения, а в отдельных регионах до 40–50% [9]. В то же время 80–90% всех страдающих аллергией имеют поражения глаз [5]. По исследованиям Ю.Ф. Майчука (2010), среди больных с подтвержденной гиперчувствительностью к пыльцевым аллергенам 91,2% имели проявления глазной аллергии [5].
Немаловажную роль в изменении структуры и росте заболеваемости играет появление относительно новых этиологических факторов, лежащих в основе патологических изменений оболочек глаза.
В медицинской литературе немало работ посвящено вопросу роли различных аллергенов при поражениях глаз при аллергических заболеваниях. Имеются краевые особенности в клиническом течении аллергических заболеваний глаз у детей, изучение которых представляет важное практическое значение [4, 13].
Слёзная жидкость представляет собой поликомпонентную метаболически активную биологическую систему, в которой активно протекают разнообразные метаболические, иммунологические, регуляторные, защитные процессы и многие биохимические реакции.
Содержимое конъюнктивальной полости до настоящего времени с позиций концепции «биологической жидкости» практически не изучалось и не имело соответствующих диагностически значимых параметров. Немногочисленные работы и наши собственные данные свидетельствуют, что отделяемое конъюнктивальной полости состоит из жидкостного и клеточного компонентов, слизи, продуцируемой мейбомиевыми железами, десквамированного эпителия, лейкоцитов и микроорганизмов. Процесс образования отделяемого относительно постоянен, но его количество и состав существенно отличаются при развитии патологических состоянии [3].
Местные иммунные механизмы аллергических заболеваний органа зрения связаны с продукцией и транспортом антител. IgA и IgG преимущественно поступающих в конъюнктивальную полость из слезы, крови или частично синтезируются в слизистой оболочке [11]. Роль этих белков велика, поскольку они участвуют в формировании неспецифического иммунитета конъюнктивы и обеспечивают защиту.
Отдельные лабораторные показатели чаще всего не позволяют оценить функциональные состояния защитных систем зрительной системы, которые характеризуются маркерами, содержащимися в слёзной жидкости, различные белки, находящиеся в гранулах нейтрофилов и эозинофилов, появляющиеся при повышенной проницаемости гематоофтальмологического барьера. На основании данных показателей можно выявлять признаки иммунологической недостаточности [6, 7]. В связи с этим использование диагностических и прогностических возможностей расчетных индексов приобретает в настоящее время все большую значимость, поскольку определенные сочетания показателей гемограммы отражают интегральные характеристики гомеостатических систем организма, формирующих неспецифические адаптационные реакции.
По данным Кобец Т.В., Некрасова В.Н. и Мотрич А.К. (2003) по изменениям в лейкоцитарной формуле, с учетом других гематологических показателей, можно судить о выраженности воспалительного процесса и эффективности проводимой терапии [2].
Диагностические и прогностические возможности расчётных индексов приобретают в настоящее время все большую значимость, поскольку определенные сочетания показателей гемограммы отражают интегральные характеристики гомеостатических систем организма, формирующих неспецифические адаптационные реакции [8].
Все выше изложенные позволило сформулировать цель настоящего исследования: изучить концентрацию иммуноглобулинов и коагуляционную активность слёзной жидкости в развитии аллергических заболеваний глаз у детей.
Материалы и методы исследования. На базе клиники Ташкентского педиатрического медицинского института было обследовано 76 больных детей с аллергическим заболеванием глаз в возрасте от 6 до 14 лет, из них количество мальчиков в обследованной группе составило 53 (70%), а девочек 23 (30%).
Больные дети с аллергическим заболеванием глаз были разделены на 2 группы. Первая группа 34 детей с аллергическими изменениями глазной поверхности, вторая группа 42 детей с инфекционными изменениями. Контрольную группу составили 12 здоровых детей в возрасте до 14 лет без клинико-функциональных и лабораторных признаков аллергических заболеваний.
Критериями исключения из исследования во всех группах являлись: приём антигистаминных и гормональных препаратов.
Всем больным детям выполняли стандартные офтальмологические обследования.
Слёзную жидкость для исследования набирали микро-канюлей из нижнего конъюнктивального свода глаза в сухую герметичную пробирку в количестве 0,5 мл.
У всех детей был проведен анализ гематологических показателей, для чего рассчитывали: лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ), индекс аллергизации (ИА), в основу которого было положено соотношение суммы клеток крови по методу предложенной Чистякова Г.Н. и соавт. (2005) [10].
Концентрацию С-реактивного белка исследовали методом ИФА, используя наборы фирмы «Моnolind» и «Immundiagnostic» представленной компанией БиоХимМак.
Концентрацию иммуноглобулина класса G, М и А исследовали методом иммуноферментного анализа (ИФА). Используя наборы фирмы «НИМАN» и “Мonolind” и «Immundiagnostik», представленных компанией БиоХимМак (Россия) и выражали в МЕ/мл.
Состояние локального гемостатического потенциала определяли на основании исследования коагуляционной активности слёзной жидкости , которую оценивали по разности временем образования сгустка при добавлении к донорской сыворотке крови исследуемой слёзной жидкости и без нее [10]. Количество фибриногена определяли с использованием наборов «Неmostat».
Полученные цифровые данные были подвергнуты статистическому анализу с помощью пакета прикладных программ «Statgrafics». Вычисляли средне-арифметического значения (М) и ошибку средне- арифметического значения (m). Вероятность справедливости нулевой гипотезы принимали при уровне значимости(p<0,05).
Результаты и обсуждение. Обычно реакции гиперчувствительности немедленного типа развиваются в пределах 30 мин. от момента воздействия аллергена. Немедленные конъюнктивальные реакции вызываются выбросом в конъюнктиву биологически активных медиаторов из гранул тучных клеток при их активации и дегрануляции. Выделяющиеся медиаторы вызывают у больного зуд век, светобоязнь, слезотечение, отек и гиперемию слизистой.
Одним из факторов активации системы комплемента по альтернативному пути является увеличение уровня иммуноглобулинов класса А, которые вызывают повышение проницаемость сосудистой стенки с развитием отека, что в свою очередь оказывает хематоксическое и повреждающее действие (табл. 1).
У детей аллергическим заболеванием глаз ассоциирующиеся инфекционными изменениями приводит к достоверному снижению секреторного иммуноглобулина А в среднем на 24% (p<0,05), тогда как в группе ассоциирующиеся аллергическими изменениями уровень sIgA в слёзной жидкости повышается на 20% (p<0,05).
При этом типе реакций у обследованных детей с инфекционными изменениями глаз могут образовываться антитела к клеткам тканей глаза главным образом класса Igg и IgМ.
Анализ полученных результатов исследовании указал на рост уровня антител класса М в 2,3 раза и класса G в 3,6 раз (р<0,05). Эти антитела называют преципитирующими за их способность образовывать преципитат при соединении с соответствующим антигеном.
Аллергическая реакция немедленного типа связана с образованием антител класса IgЕ, которые фиксируются на тучных клетках и способствуют выделению гистамина, гепарина и др. Видимо, рост количества эозинофилов у обследуемых лиц в обеих группах, обусловлен наличием в этих клетках гистаминозы и гепаринозы, которые нейтрализуют биогенные амины и гепарин. В свою очередь, следует отметить, что гистамин хемотоксичен к эозинофилу.
Таблица 1. Показатели крови и слёзной жидкости у больных аллергическим заболеванием глаз
Примечание: * - достоверность различий р <0,05 при сравнении с контрольной группой; СЖ – слезная жидкость
Реакции гиперчувствительности немедленного типа вызывают выброс в конъюнктиву биологически активных медиаторов из гранул тучных клеток при их активации и дегрануляции, что связано высоким уровнем антител класса IgE. Уровень IgE в слёзной жидкости у детей с аллергическими изменениями глаз повышается в среднем в 2,2 раза (p<0,05), указывая тем самым на усиления состояния хемотаксиса эозинофилов в слёзной жидкости. Между тем среди обследуемых детей с инфекционными изменениями глаз, изучаемый показатель превысил исходный уровень на 43% (p<0,05).
Аллергия играет ведущую роль в клинической картине неинфекционной и инфекционной природы заболеваний глаз [12]. Используя гематологические индексы мы решили, дифференцирована подойти к пониманию некоторой стороны этиопатогенеза аллергических заболеваний глаз у детей, в частности условно разделили больных детей на две группы: с инфекционными изменениями и аллергическими изменениями.
Как видно из представленных результатов исследований (табл.2), у 34 больных детей отмечено достоверное повышение индекса интоксикации и остроты воспаления в 3,2 раза(p<0,05) при сравнении со здоровыми детьми, тогда как у 42 детей отмечено нарастание ИА в среднем 2 раза (p<0,05).
При этом повышение ЛИИ связано с уменьшением процентного содержания ядерных форм лейкоцитов и снижением число лимфоцитов. Появление в крови обследуемых детей с аллергическими изменениями глаз молодых и незрелых форм нейтрофилов свидетельствует о напряженности компенсаторных процессов обеспечивающих детоксикацию [1]. У детей с инфекционными изменениями наблюдалась обратная картина, так было отмечено достоверное повышение показателей ЛИИ у детей с инфекционными изменениями в 3,3 раза (Р<0,05) по сравнению с контрольными показателями и в 17,3 раза по сравнению с детьми при аллергических изменениях глаз (Р<0,01).
Таблица 2. Показатели слёзной жидкости у больных аллергическим заболеванием глаз
Примечание: *- достоверность различий (p<0,05) при сравнении с группой контроля, СЖ - слёзная жидкость
Об активации воспалительного процесса в I-группе больных детей также судили по концентрации С-реактивного белка, уровень которого превысил исходные значения в 30 раз в группе с инфекционными изменениями, тогда как в группе ассоциированный аллергическими изменениями уровень С-реактивного белка превысил исходные значения всего в 10 раз (p<0,05) при сравнении с контрольной группой. Следовательно, изучая интегральные гематологические индексы и уровень С-реактивного белка в слёзной жидкости мы подтвердили природу аллергических заболеваний глаз, а именно ассоциированной инфекцией и аллергией.
Как известно, при данной патологии немаловажную роль играет локальный гемостатический потенциалы. В связи с этим мы решили оценить степень информативности исследований коагуляционной активности слёзной жидкости при данной патологии.
Так коагуляционная активность в слёзной жидкости (СЖ) была достоверно повышена в зависимости от показателей контрольной группы (p<0,05). У детей с и инфекционными изменениями эти показатели достоверно снижены и отличались от показателей с аллергическими изменениями (62,8±4,56 сек. против 82,6±7,01 сек; p<0,05).
Уровень содержания фибриногена в слёзной жидкости имел тенденцию к повышению в обеих группах по сравнению с контрольными значениями (Р<0,05). Наиболее высокие показатели регистрировались у детей с аллергическими изменениями (331,2±11,02 нг/дл против 264,6±8,51 нг/дл; Р<0,05).
Таким образом, при анализе полученных данных установлено, что показатели коагуляционной активности слёзной жидкости и концентрации фибриногена у пациентов обоих групп достоверно отличаются от контрольных величин и между собой, что свидетельствовало о повышении локального гемостатического потенциала.
При этом динамика коагуляционной активности СЖ и содержание фибриногена при данной патологии указывает на гемоциркуляторные расстройства в сосудах сетчатки и хориоидеи, что указывает важность исследования показателей гемостаза при воспалительных и аллергических процессах.
Выводы
1. У больных детей с аллергическим заболеванием глаз ассоциирующееся аллергическими изменениями отмечено повышение индекса аллергизации и Ig Е, на фоне снижения уровня С - реактивного белка и содержания Ig М и G в слёзной жидкости.
2. У детей с инфекционными изменениями на основании изучения гематологических индексов выявлены аллергические повреждения глаз по типу гиперчувствительности замедленного типа, сопровождающиеся увеличением ЛИИ, С – реактивного белка и Ig G в слёзной жидкости.
3. Изменения показателей коагуляционной активности слёзной жидкости и концентрации фибриногена у детей с аллергическими заболеваниями глаз указывают на гемоциркуляторные расстройства в сосудах сетчатки и хориоидеи.